DIN EN 16924:2017 pdf download.Foodstuffs – Determination of zearalenone in edible vegetable oils by LC-FLD or LC-MS/MS.
6 Durchfuhrung
6.1 Extraktion von Zearalenon aus der Probe
6.1.1 Ailgemeines
2 g Probe werden in em 50-ml-Zentrifugenrohrchen (5.10) auf 0,01 g eingewogen und mit 2,0 ml
Verdunnungslosemittel (4.2) und 20,0 ml alkalischer Methanol-Extraktionslosung (Ve) (4.6) versetzt.
Wird die Probe mit LC-MS/MS gemessen, werden 40 il interne Zearalanon-Standardlosung (ISTD 1) (4.11.9)
vor der Extraktion zur Probe hmnzugegeben (entspricht einem Massenanteil von 200 rig/kg Zearalanon in der
Probe).
Zur Bestimmung der Wiederfindungsrate werden vor der Extraktion 40 il Zearalenon-Standardlosung (4.9) zur Probe hinzugefugt (entspricht einem Massenanteil von 200 rig/kg Zearalenon in der Probe) und die Losung wird bei Raumtemperatur etwa 5 mm stehengelassen.
Das Gemisch wird etwa 20 mm mit elnem Laborschüttler (5.4) extrahiert und zur Phasentrennung 10 mm bei etwa 3 000 g zentrifugiert (5.8).
6.1.2 Vorbereitung für LC-FLD
5,0 ml des kiaren alkalischen Methanol-Uberstandes des Extraktes werden bei 40 °C bis zur Trockene eingeengt und in 1,0 ml mobiler Phase A (4.10.2) aufgenommen.
Der Rückstand wird in einem Ultraschallbad (5.3) gelöst. Falls erforderlich, wird die Probenlosung nochmals in einer Mikrozentrifuge (5.9) 2 mm bei 14 000g zentrifugiert und in em LC-Fläschchen (5.11) überführt.
6.1.3 Vorbereitung fir LC-MS/MS
Ein Aliquot des klaren alkalischen Methanol-Uberstandes wird in ein LC-Flaschchen (5.11) iberfihrt. Wenn isotopenmarkiertes Zearalenon ([ISTD 2) [4.11.7) zur Erkennung der Matrixeffekte verwendet wird, wird dieser Uberstand verdunnt. In diesem Falle muss der Methanolgehalt dieses verdunnten Uberstandes
weiterhin 90 % betragen.
6.2 LC-FLD-Analyse .
Gleiche geeignete Volumina der Probenmesslosung und jeder Kalibrierlosung (4.10.4) werden in das LC- FLD-System injiziert.
Die in Tabelle 3 aufgefuhrten LC-Parameter werden als Richtwerte angesehen. Abhängig von der Trennsäule (RP-18-Säulenpackung, verschiedene Sau1enmae) solite das Elutionsmittelverhältnis und/oder der Durchfluss so angepasst werden, dass die beste Trennung zwischen dem Analyten und den anderen Extraktbestandteilen der Matrix erreicht wird. Beispielchromatogramme sind in den Bildern A.1 und A.2 in Anhang A dargestelit. Falls Schwierigkeiten (z. B. chromatographische lnterferenzen) während der Analyse auftreten, wird empfohlen, die LC-MS/MS für den Nachweis- und Bestätigungsschritt anzuwenden.
6.3 LC-MS/MS-Analyse
Em geeignetes Volumen der Probenmesslosung und die gleichen Volumina von jeder Kalibrierlosung (4.11.1 1) werden in das LC-MS/MS-System injiziert.
Die Trenn- und Detektionsparameter für die Analytbestimmung müssen für jedes Messsystem optimiert werden. Geeignete Beispielsysteme sind in Anhang B angegeben.DIN EN 16924 pdf download.